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簡(jiǎn)要描述:高通量皮升級(jí)液滴單細(xì)胞分選儀(Droplet Entrapping Microflfluidic cell-sorter)是基于液滴微流控技術(shù)開發(fā)而成的超高通量單細(xì)胞分選平臺(tái)
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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
高通量皮升級(jí)液滴單細(xì)胞分選系統(tǒng)(Droplet Entrapping Microfluidic Cell-sorter, DREM cell)是基于液滴微流控技術(shù)開發(fā)而成的超高通量單細(xì)胞分選平臺(tái)。它每秒可以發(fā)生成千上萬(wàn)的微液滴(pL),細(xì)胞包裹于微液滴之中,可進(jìn)行生長(zhǎng)、裂解、代謝、反應(yīng)等生物生化過(guò)程,并與液滴之中的熒光篩子進(jìn)行充分結(jié)合,產(chǎn)生不同強(qiáng)度的熒光信號(hào);之后利用微液滴分選技術(shù)將低產(chǎn)出和高產(chǎn)出的細(xì)胞通過(guò)熒光信號(hào)分選出來(lái),實(shí)現(xiàn)分選過(guò)程的高通量化。
二、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)
三、應(yīng)用場(chǎng)景:
四、技術(shù)參數(shù):
序號(hào) | 分類 | 技術(shù)參數(shù) |
1 | 液滴直徑 | 20-40μm |
2 | 液滴生成速度 | 可達(dá)10000個(gè)/s |
3 | 液滴微注入速度 | 可達(dá)1000個(gè)/s(選配) |
4 | 液滴分選速度 | 可達(dá)1000個(gè)/s |
5 | 樣品區(qū)溫度控制 | 4℃±0.5℃恒溫控制 |
6 | 檢測(cè)方法 | 熒光檢測(cè) |
7 | 熒光激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng) | 405/460nm;488/525nm;532/578nm;561/620nm等,可定制 |
8 | 應(yīng)用范圍 | 細(xì)菌、酵母、細(xì)胞、蛋白、核酸等 |
五、應(yīng)用案例
案例一:合成D-阿洛酮糖3-差向異構(gòu)酶定向進(jìn)化
構(gòu)建了基于液滴微流控(DREM cell)的超高通量篩選平臺(tái),并與D-阿洛酮糖生物傳感器相結(jié)合,用于酮糖3-差向異構(gòu)酶(KEases)的定向進(jìn)化;獲得突變體M3-2的催化效率比原始sfDAE提高17倍
——Angewandte Chemie,2023
案例二:高產(chǎn)谷氨酰胺突變株高通量篩選
利用高通量皮升級(jí)液滴微流控細(xì)胞分選儀(DREM cell),對(duì)常壓室溫等離子體(ARTP)誘變的解淀粉芽孢桿菌全基因組突變庫(kù)進(jìn)行超高通量篩選,成功獲得了一株谷氨酰胺酶產(chǎn)量提高47%以上的突變株
—— Biochemical Engineering,2022
案例三:谷氨棒桿菌高效分泌蛋白關(guān)聯(lián)基因挖掘
在谷棒中繪制了蛋白分泌的基因型-表型關(guān)聯(lián)圖譜,系統(tǒng)地揭示了其基因組中能夠用于改善分泌蛋白生產(chǎn)的基因位點(diǎn),通過(guò)氧還轉(zhuǎn)錄因子CosR和RshA的組合敲除獲得VHH產(chǎn)量提高2.78倍的底盤菌株
—— Metabolic Engineering,2022
案例四:?jiǎn)渭?xì)胞培養(yǎng)的蜜蜂腸道微生物功能多樣性研究
該研究利用高通量液滴微流控平臺(tái)(DREM cell),對(duì)蜜蜂腸道單個(gè)細(xì)菌進(jìn)行皮升級(jí)液滴培養(yǎng)和niao槍法宏基因組測(cè)序,通過(guò)宏基因組分析展示了蜜蜂腸道微生物的菌株水平多樣性,揭示了不同細(xì)菌屬中潛在新菌株的存在
——Microbiome, 2022
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